闭锁连接蛋白-1核酸适配体的筛选与初步应用 |
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引用本文: | 李玉娟,张瀚文,刘珊,王佳平,李勇枝.闭锁连接蛋白-1核酸适配体的筛选与初步应用[J].北京理工大学学报,2023(8):870-877. |
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作者姓名: | 李玉娟 张瀚文 刘珊 王佳平 李勇枝 |
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作者单位: | 1. 北京理工大学生命学院;2. 中国航天员科研训练中心航天员健康中心重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基资助项目(81973572); |
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摘 要: | 基于配体指数富集系统进化技术筛选闭锁连接蛋白-1的核酸适配体,最终筛选到15条ZO-1的核酸适配体(APTZO-1).排除线性结构与相似结构后,采用酶联免疫吸附法表征了9条APTZO-1与ZO-1亲和力的大小,排序依次为:APTZO-1 8>APTZO-1 2>APTZO-1 7>APTZO-1 13>APTZO-1 1>APTZO-1 5>APTZO-1 15>APTZO-1 12>APTZO-1 4.采用Cy5荧光基团标记APTZO-1 8(Cy5-APTZO-1 8),证实了其能对人结直肠腺癌细胞(Caco-2)与人脑微管内皮细胞(hCMEC/D3)的ZO-1进行荧光定位与半定量分析,且与基于ZO-1抗体法的免疫荧光与蛋白印迹实验结果基本相似.本研究首次筛选到了ZO-1的系...
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关 键 词: | 闭锁连接蛋白-1 配体指数富集系统进化 核酸适配体 荧光标记 半定量分析 |
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