| 一种嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶基因在大肠杆菌中的诱导表达与活性表征 |
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| 引用本文： | 王凤寰,续丹丹,王玉海,于云娟.一种嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶基因在大肠杆菌中的诱导表达与活性表征[J].北京化工大学学报(自然科学版),2015,42(5). |
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| 作者姓名： | 王凤寰 续丹丹 王玉海 于云娟 |
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| 作者单位： | 北京工商大学食品学院食品添加剂与配料北京高校工程研究中心,北京,100048;北京工商大学食品学院食品添加剂与配料北京高校工程研究中心,北京,100048;北京工商大学食品学院食品添加剂与配料北京高校工程研究中心,北京,100048;北京工商大学食品学院食品添加剂与配料北京高校工程研究中心,北京,100048 |
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| 摘 要： | 从嗜酸普鲁兰芽孢杆菌基因组中扩增出普鲁兰酶基因Pul A,并将该基因连接到大肠杆菌表达载体p ET-28a中,构建了普鲁兰酶基因的诱导表达载体p ET-28a-Pul A。测序结果表明,普鲁兰酶基因Pul A长度为2766 bp,编码922个氨基酸。将重组载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,普鲁兰酶基因Pul A在IPTG诱导下获得表达,产生胞内蛋白。SDS-PAGE测定的分子量约为110 k D。细胞超声破碎液酶活为0.45 U/m L。该酶的最适温度为55℃,最适p H为5.0,金属离子对酶活性影响不显著,具有I型普鲁兰酶特性。此重组普鲁兰酶的酶学性质表明此酶具有独特的耐酸性质,具备一定的工业化应用价值。
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| 关 键 词： | 普鲁兰酶 基因克隆 基因表达 |
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