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StyS激酶自磷酸化对Pseudomonas putida B3中靛蓝生物合成的调节作用
引用本文:任明婧,陶德江,程雷,梁杉,王成涛.StyS激酶自磷酸化对Pseudomonas putida B3中靛蓝生物合成的调节作用[J].北京工商大学学报(自然科学版),2021,39(4):79-86.
作者姓名:任明婧  陶德江  程雷  梁杉  王成涛
作者单位:北京工商大学 北京食品营养与人类健康高精尖创新中心/北京市食品添加剂工程技术研究中心, 北京 100048
摘    要:在恶臭假单胞菌Pseudomonas putida B3中,靛蓝生物合成关键酶基因styAB上游存在一个二元调控系统StyS-StyR。StyS蛋白属于激酶家族,是磷酸化信号转导的重要媒介,但激酶StyS的自磷酸化传导机制对靛蓝生物合成的调节作用尚未探明,因此,研究以Pseudomonas putida B3中激酶蛋白StyS作为研究对象,发现了两个磷酸化结合位点,构建了磷酸化位点突变株。通过分析野生菌株P. putida B3、styS基因缺失菌株P. putida B3-ΔstyS、styS基因回补菌株P. putida B3-ΔstyS-8和磷酸化位点突变株P. putida B3-ΔstyS-1之间的靛蓝产量及酶活发现,P. putida B3产量为10.14mg/L,P. putida B3-ΔstyS-8产量为3.63mg/L,磷酸化位点突变菌株无激酶活性且失去了产生靛蓝的能力。结果表明,StyS自磷酸化作用在靛蓝发酵体系中起重要作用。研究结果将为靛蓝生物合成途径的进一步研究提供参考。

关 键 词:恶臭假单胞菌    靛蓝生物合成    二元系统    磷酸化    质谱    定点突变
收稿时间:2020/3/19 0:00:00

Regulatory Effect of StyS Kinase Autophosphorylation on Indigo Biosynthesis in Pseudomonas putida B3
Institution:Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health/Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additive, Beijing Technology and Business University, Beijing 100048, China
Abstract:
Keywords:Pseudomonas putida  indigo biosynthesis  two-component system  phosphorylation  mass spectrometry  site-directed mutation
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