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烟曲霉脂肪酶B在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究
引用本文:唐薇,黄伟谦,杨博,王永华,蓝东明.烟曲霉脂肪酶B在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究[J].北京工商大学学报(自然科学版),2019,37(2):36-41.
作者姓名:唐薇  黄伟谦  杨博  王永华  蓝东明
作者单位:华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510641,华南理工大学 生物科学与工程学院, 广东 广州 510006,华南理工大学 生物科学与工程学院, 广东 广州 510006,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510641,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510641
摘    要:从烟曲霉Aspergillus fumigatus GIM3.20中克隆获得了一种脂肪酶B基因(AFLB)。通过序列比对,发现AFLB与南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)的氨基酸序列有31%的一致性,两者同属CALB家族脂肪酶;AFLB 含有与家族其他成员类似的保守五肽序列(SWSQG),预测AFLB的催化三联体分别为S233、D318和H361,其中Ser233位于保守五肽序列中;此外AFLB含有一段N-端延长序列(由第1~128位氨基酸组成),是曲霉属脂肪B的特有序列。在毕赤酵母中成功地异源表达了脂肪酶AFLB,并通过亲和层析进行了纯化。SDS电泳结果显示,该酶存在部分高度N-糖基化和部分无糖基化的两种形态,对应分子量分别为45~66kDa和42kDa。酶学性质表征结果显示,重组脂肪酶AFLB最适反应pH 值为7.0,最适反应温度为40℃,并在50℃以下具有较好稳定性,其最适底物为肉豆蔻酸对硝基苯酯。脂肪酶AFLB与CALB有高度亲缘性,具有潜在的工业应用前景。

关 键 词:烟曲霉    脂肪酶    重组表达    毕赤酵母    酶学性质
收稿时间:2019/2/25 0:00:00

Expression of Aspergillus fumigates Lipase B in Pichia pastoris and Biochemical Characterization
TANG Wei,HUANG Weiqian,YANG Bo,WANG Yonghua and LAN Dongming.Expression of Aspergillus fumigates Lipase B in Pichia pastoris and Biochemical Characterization[J].Journal of Beijing Technology and Business University:Natural Science Edition,2019,37(2):36-41.
Authors:TANG Wei  HUANG Weiqian  YANG Bo  WANG Yonghua and LAN Dongming
Institution:School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510641, China,School of Biology and Biological Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China,School of Biology and Biological Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China,School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510641, China and School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510641, China
Abstract:
Keywords:
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