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碱性蛋白酶交联聚集体的制备及其催化性能研究
引用本文:区晓阳,曾英杰,彭飞,倪子富,熊隽,宗敏华,娄文勇.碱性蛋白酶交联聚集体的制备及其催化性能研究[J].北京工商大学学报(自然科学版),2019,37(3):33-40.
作者姓名:区晓阳  曾英杰  彭飞  倪子富  熊隽  宗敏华  娄文勇
作者单位:华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640,华南理工大学 食品科学与工程学院, 广东 广州 510640;华南协同创新研究院 生物活性分子开发与应用创新中心, 广东 东莞 221116
摘    要:碱性蛋白酶在食品、医药、酿造、丝绸、皮革等行业中发挥着重要作用。制备了碱性蛋白酶交联体,并对其催化性能进行研究。在最佳制备条件下(90%叔丁醇作为沉淀剂,沉淀时间为15min,交联剂浓度为33mmol/L,交联时间为6h),交联酶的酶活回收率为22.6%。与游离酶相比,交联酶的最适pH值向碱性方向变化,由7.5变为8.0,最适温度由60℃变成65℃。酶动力学研究表明,交联酶对酪蛋白的催化水解能力(4.3min-1)比游离酶(3.7min-1)更高。尽管交联酶最大反应速度Vmax(9.8mg/(mL·min))低于游离酶(13.3mg/(mL·min)),但交联酶对底物的亲和力Km(2.3mg/mL)比游离酶(3.6mg/mL)有所增加,而且其热稳定性和酸碱稳定性都得到一定程度的提高。另外,在磷酸盐缓冲液中重复使用5和8批次后,交联酶还能保持82.5%和56.5%的酶活性。

关 键 词:碱性蛋白酶    无载体固定化    交联酶聚集体    酶学性质    重复使用稳定性
收稿时间:2019/4/15 0:00:00

Preparation and Characteristics of Cross-Linked Enzyme Aggregates of Alkaline Protease
OU Xiaoyang,ZENG Yingjie,PENG Fei,NI Zifu,XIONG Jun,ZONG Minhua and LOU Wenyong.Preparation and Characteristics of Cross-Linked Enzyme Aggregates of Alkaline Protease[J].Journal of Beijing Technology and Business University:Natural Science Edition,2019,37(3):33-40.
Authors:OU Xiaoyang  ZENG Yingjie  PENG Fei  NI Zifu  XIONG Jun  ZONG Minhua and LOU Wenyong
Institution:School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China,School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China,School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China,School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China,School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China,School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China and School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;Innovation Center of Bioactive Molecule Development and Application, South China Institute of Collaborative Innovation, Dongguan 221116, China
Abstract:
Keywords:alkaline protease  carrier-free immobilization  cross-linked enzyme aggregates  enzymatic characteristics  reuse stability
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