阿维菌素B产生菌寡霉素合成阻断株的构建 |
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引用本文: | 张晓琳,陈芝,赵金雷,宋渊,文莹,李季伦.阿维菌素B产生菌寡霉素合成阻断株的构建[J].科学通报,2004,49(1):90-94. |
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作者姓名: | 张晓琳 陈芝 赵金雷 宋渊 文莹 李季伦 |
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作者单位: | 中国农业大学生物学院微生物系,北京,100094 |
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基金项目: | 本工作为国家高技术研究发展计划(批准号: 2001AA214071)资助项目. |
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摘 要: | 以仅产阿维菌素(avermectin) B和寡霉素(oligomycin)的阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)CZ8-73为出发菌株, 构建基因缺失载体pXL05(pKC1139∷ΔolmA1 + ΔolmA4), 并将其转入CZ8-73中, 通过缺失质粒和染色体之间的同源双交换, 对染色体上长达90 kb的寡霉素PKS基因簇(olmA)进行了缺失突变. 将4株经Southern杂交验证正确的基因缺失突变株进行摇瓶发酵和HPLC检测, 发现4个突变株均不再产生寡霉素而仅产阿维菌素B组分, 阿维菌素的总产量和B1的产量与出发菌株相当, 说明寡霉素PKS基因簇的缺失并不影响阿维菌素的生物合成. 该缺失突变是在染色体上通过同源双交换完成的, 不会发生进一步的重组, 因此突变株性状稳定, 在工业生产上具有应用价值.
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关 键 词: | 阿维链霉菌 寡霉素 阿维菌素 olmA基因缺失 |
收稿时间: | 2003-09-19 |
修稿时间: | 2003-11-28 |
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