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Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用
引用本文:王震.Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用[J].科学通报,2004,49(21):2173-2177.
作者姓名:王震
作者单位:[1]中国医学科学院,中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心,北京100037 [2]华中科技大学同济医学院基础医学院,武汉430030 [3]延边大学医学院附属医院检验科,延吉133000 [4]华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,武汉430030
基金项目:本工作为国家自然科学基金(批准号: 30270557和30300131)及北京市重大科技项目(No. H020220020310)资助项目.
摘    要:为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性, 并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质, 对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验, 并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验. 结果发现, 在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力. 进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选, 得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和a胰蛋白酶抑制物重链前体 (ITIH). 通过免疫共沉淀实验, 验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用. 通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白, 并且能够同Filamin相结合. 由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白, 起到了参与细胞黏着斑形成的过程.

关 键 词:Nelin  肌动蛋白  酵母双杂交  免疫共沉淀  细胞骨架蛋白
收稿时间:2004-05-10
修稿时间:2004-10-18
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