| 尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达 |
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| 引用本文： | 贺晨霞,吴文君,丁友法,冯登敏,陈立,陈浩明,姚纪花,沈琦,卢大儒,薛京伦.尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达[J].科学通报,2003,48(5):447-451. |
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| 作者姓名： | 贺晨霞 吴文君 丁友法 冯登敏 陈立 陈浩明 姚纪花 沈琦 卢大儒 薛京伦 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海,200433
2. 第二军医大学附属长海医院内分泌科,上海,200433
3. 浙江省丽水市医院,丽水,323000 |
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| 基金项目： | 国家“八六三”高技术研究发展计划(批准号:2001AA217181)，国家自然科学基金(批准号:30100102)，教育部优秀论文基金(批准号:199925)，霍英东基金(批准号:71019)，高等学校优秀青年教师奖励计划(批准号:JRAPOYT)资助项目. |
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| 摘 要： | 尾静脉大容量快速注射裸质粒DNA能够介导外源基因在动物肝内高效表达, 采用此方法将人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)表达质粒pCMV-hFⅨ 2.2 mL于7 s内导入小鼠体内, hFⅨ在小鼠体内表达水平最高为2921 ng/mL(血浆). hFⅨ表达水平与裸质粒DNA注射剂量呈正相关, 重复注射的hFⅨ表达水平偏低(最高1459 ng/mL). PCR检测发现小鼠多种器官中存在hFⅨ cDNA, RT-PCR和免疫组化切片检测表明, hFⅨ mRNA和蛋白主要在肝脏中表达. 转氨酶水平与病理切片检测表明, 注射1 d后5%的肝脏细胞受到损伤, 但在3 ~ 10 d内恢复. 研究结果表明, 尾静脉大容量快速注射法能够介导hFⅨ在小鼠体内高水平表达, 为基因治疗研究提供了一项简便而实用的动物实验手段.
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| 关 键 词： | 人凝血因子Ⅸ 基因转移 裸质粒 尾静脉注射 |
| 收稿时间： | 2002-09-29 |
| 修稿时间： | 2002年9月29日 |
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