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基于AFM 单分子力谱技术的CD20-Rituximab 间相互作用力测量
引用本文:李密,刘连庆,席宁,王越超,董再励,李广勇,肖秀斌,张伟京.基于AFM 单分子力谱技术的CD20-Rituximab 间相互作用力测量[J].科学通报,2011,56(32):2681-2688.
作者姓名:李密  刘连庆  席宁  王越超  董再励  李广勇  肖秀斌  张伟京
作者单位:中国科学院沈阳自动化研究所机器人学国家重点实验室;中国科学院研究生院;Department of Electrical and Computer Engineering;Michigan State University;University of Pittsburgh;军事医学科学院附属医院淋巴科;
基金项目:国家自然科学基金(60904095); 国家高技术研究发展计划(2009AA03Z316); 中国科学院、国家外国专家局创新团队国际合作伙伴计划资助项目
摘    要:原子力显微镜(AFM)的发明为测量分子间特异性相互作用力提供了新的技术手段.利用AFM 单分子力谱 (SMFS) 技术分别测量了提纯的CD20, 淋巴瘤Raji 细胞表面的CD20 和淋巴瘤病人B 细胞表面的CD20 与Rituximab (抗CD20 单克隆抗体)之间的相互作用力. 通过探针功能化技术, 将Rituximab 连接到AFM针尖; 通过基底功能化技术, 将提纯的CD20分子吸附到云母表面, 对CD20分子进行了AFM成像, 并测量了CD20与Rituximab 之间的相互作用力; 通过静电吸附和化学固定, 将淋巴瘤Raji 细胞和淋巴瘤病人细胞固定到载玻片表面, 对Raji 细胞和病人细胞进行了AFM 成像, 并分别测量了Raji 细胞表面的CD20 和病人B 细胞表面的CD20 与Rituximab 之间的相互作用力. 比较并分析了在提纯的CD20 分子表面、Raji 细胞表面和病人B 细胞表面测量CD20-Rituximab 相互作用力的差异,实验结果表明Raji 细胞表面的CD20 与Rituximab 之间的相互作用力明显小于提纯的CD20 以及淋巴瘤病人B 细胞表面的CD20 与Rituximab 之间的相互作用力, 为深入研究造成Rituximab 耐药性差异的分子机理提供了技术思路和实验方法.

关 键 词:原子力显微镜  单分子力谱  非霍奇金淋巴瘤  单克隆抗体
收稿时间:2011-06-11
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