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食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用
引用本文:刘立兵,南汇珠,孙晓霞,姜彦芬,王金凤,王建昌.食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用[J].北京工商大学学报(自然科学版),2018,36(1):89-94.
作者姓名:刘立兵  南汇珠  孙晓霞  姜彦芬  王金凤  王建昌
作者单位:河北出入境检验检疫局技术中心, 河北 石家庄 050051;河北省检验检疫科学技术研究院, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局技术中心, 河北 石家庄 050051;河北省检验检疫科学技术研究院, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局技术中心, 河北 石家庄 050051;河北省检验检疫科学技术研究院, 河北 石家庄 050051
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科研项目(2016IK107)。
摘    要:为实现简便快速地检测蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),根据GenBank中蜡样芽胞杆菌16S RNA序列设计特异性引物和exo探针,建立了一种实时荧光重组酶聚合酶扩增方法,在39℃恒温下仅需20min即可完成检测。该方法特异性扩增蜡样芽胞杆菌16S RNA基因片段,对其他芽胞杆菌和非芽胞杆菌无扩增;以蜡样芽胞杆菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.0×10-3ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致。人工污染实验表明,当大米饭中蜡样芽胞杆菌污染量≥1.5×104CFU/g时,即可通过real-time RPA方法检出,所需时间仅为6~13min;而当污染量≥1.5×105CFU/g时,才能通过real-time PCR方法检出,所需时间至少为30min(Ct值为20~31)。

关 键 词:蜡样芽胞杆菌    等温扩增    实时荧光RPA    检测方法
收稿时间:2017/9/13 0:00:00

Development and Application of Real-Time Recombinase Polymerase Amplification Assay for Detection of Bacillus cereus in Food
LIU Libing,NAN Huizhu,SUN Xiaoxi,JIANG Yanfen,WANG Jinfeng and WANG Jianchang.Development and Application of Real-Time Recombinase Polymerase Amplification Assay for Detection of Bacillus cereus in Food[J].Journal of Beijing Technology and Business University:Natural Science Edition,2018,36(1):89-94.
Authors:LIU Libing  NAN Huizhu  SUN Xiaoxi  JIANG Yanfen  WANG Jinfeng and WANG Jianchang
Institution:Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Technical Center, Shijiazhuang 050051, China;Hebei Academy of Science and Technology for Inspection and Quarantine, Shijiazhuang 050051, China,Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Technical Center, Shijiazhuang 050051, China,Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Technical Center, Shijiazhuang 050051, China;Hebei Academy of Science and Technology for Inspection and Quarantine, Shijiazhuang 050051, China,Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Technical Center, Shijiazhuang 050051, China,Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Technical Center, Shijiazhuang 050051, China and Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Technical Center, Shijiazhuang 050051, China;Hebei Academy of Science and Technology for Inspection and Quarantine, Shijiazhuang 050051, China
Abstract:
Keywords:Bacillus cereus  isothermal amplification  real-time RPA  detection method
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