转抗细胞凋亡基因p35黏虫细胞克隆株研究 |
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引用本文: | 郑桂玲,李长友,李国勋,Wang Ping.转抗细胞凋亡基因p35黏虫细胞克隆株研究[J].科学通报,2005,50(20):2226-2230. |
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作者姓名: | 郑桂玲 李长友 李国勋 Wang Ping |
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作者单位: | 莱阳农学院害虫生物防治研究室,青岛,266109;Boyce Thompson Institute at Cornell University, Ithaca, NY 14850, USA. |
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基金项目: | 致谢 本工作为国家自然科学基金(批准号:30370963)和莱阳农学院高层次人才基金(批准号:630320)资助项目. |
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摘 要: | 通过脂质体介导的方法将抗细胞凋亡p35基因导入黏虫细胞系Ms7311, 经Zeocin抗性筛选和细胞克隆, 获得了转基因细胞株TMs7311. PCR检测证明, 转基因细胞株基因组DNA中含有p35基因特异扩增谱带. 该转基因细胞株形态与原始细胞系不同, 生长速度快, 群体倍增时间为25.4 h, 对磷酸缓冲液(PBS)有较强的营养抗性, 能抑制放线菌素D诱导的细胞凋亡; 病毒产量和β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)以及碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase, SEAP)的表达水平明显高于原始细胞系Ms7311, 是一株高表达重组蛋白和高产杆状病毒的优良细胞株.
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关 键 词: | p35基因 黏虫细胞系 重组蛋白 细胞凋亡 |
收稿时间: | 2005-04-14 |
修稿时间: | 2005-04-142005-08-31 |
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