Spindlin 1编码的蛋白质定位于细胞核并使NIH3T3细胞发生恶性转化 |
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作者姓名: | 高艳红 秦立篷 张鹏 陈琳 袁红丰 白慈贤 闫舫 岳文 裴雪涛 |
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作者单位: | 军事医学科学院输血研究所干细胞生物学研究室,北京,100850 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,首都创新工程项目(248项目),国家重点基础研究发展计划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划) |
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摘 要: | 研究了卵巢癌中高表达的新基因spindlin1的亚细胞定位及其对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响, 并探讨了人spindlin1基因的生物学功能. 采用脂质体转染法将构建的融合蛋白表达载体pEGFP-N1/ pEGFP-N1-spindlin1瞬时转染COS-7细胞,观察spindlin1基因的亚细胞定位;同时稳定转染NIH3T3细胞,经G418抗性筛选后,用RT-PCR筛选并鉴定表达spindlin1的稳定细胞株;通过细胞增殖活性、流式细胞检测、软琼脂克隆形成、迁移实验及裸鼠成瘤等对转染细胞的生物学行为进行检测. 结果表明,spindlin1定位于胞核;并促进NIH3T3细胞的增殖,使其处于G2/M期的细胞比例显著增加;同时证实过表达spindlin1的NIH3T3细胞不仅具明显的克隆形成及迁移能力,而且能使裸鼠成瘤. 由此我们得出结论:spindlin1基因过表达可促使NIH3T3细胞发生恶性转化,提示spindlin1可能是一种与肿瘤形成相关的原癌基因.
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关 键 词: | 基因转染 亚细胞定位 成瘤性 |
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