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双抗体夹心ELISA法检测海产蟹血卵涡鞭虫方法的初步建立
引用本文:查智辉,施慧,谢建军,许文军,孙忠. 双抗体夹心ELISA法检测海产蟹血卵涡鞭虫方法的初步建立[J]. 浙江海洋学院学报(自然科学版), 2011, 30(1)
作者姓名:查智辉  施慧  谢建军  许文军  孙忠
作者单位:浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江,舟山,316100
基金项目:浙江省自然科学基金,浙江省大学生科技创新项目(新苗计划)
摘    要:以针对血卵涡鞭虫的特异性单克隆抗体为捕获抗体,纯化的抗血卵涡鞭虫的兔抗血清为检测抗体,初步建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELISA方法.方阵滴定确定最佳反应条件:包被的单克隆抗体浓度为10μg/mL,多抗兔血清工作浓度为14.3 μg/mL,待检样品稀释度为1:800;HRP-羊抗鼠IgG按1:20 000稀释.用建立的ELISA方法对86份已知背景样品进行检测,阳性检出为97.6%,血卵涡鞭虫抗原检测的灵敏度为100 pg/mL;与蟹血淋巴细胞、假丝酵母菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等样本均无交叉反应.结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于诊断梭子蟹乳化病血卵涡鞭虫病的检测.

关 键 词:血卵涡鞭虫  三疣梭子蟹  单克隆抗体  双抗体夹心ELISA法

Establishment of Double Antibody-Sandwich ELISA for Detection of Marine Crab Hematodinium sp.
ZHA Zhi-hui,SHI Hui,XIE Jian-jun,et al. Establishment of Double Antibody-Sandwich ELISA for Detection of Marine Crab Hematodinium sp.[J]. Journal of Zhejiang Ocean University(Natural Science Edition), 2011, 30(1)
Authors:ZHA Zhi-hui  SHI Hui  XIE Jian-jun  et al
Affiliation:ZHA Zhi-hui,SHI Hui,XIE Jian-jun,et al(Marine and Fishery Research Institute of Zhejiang Ocean University,Marine and Fisheries Research Institute of Zhejiang Province,Zhejiang Province Key Lab of Mariculture and Enhancemen,Zhoushan 316100,China)
Abstract:
Keywords:Hematodinium sp  Portunus trituberculatus  monoclonal antibody  double antibody-sandwich ELISA  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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