| Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域介导盐抗性和pH感应 |
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| 作者姓名： | 杨礼富①② 张博① 王磊① 杨苏声① |
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| 作者单位： | ① 中国农业大学生物学院微生物与免疫学系, 农业微生物资源与应用农业部重点实验室, 北京 100193;
② 中国热带农业科学院橡胶研究所, 热带作物栽培生理学农业部重点开放实验室, 儋州 571737 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(批准号: 2003AA241150)和国际科技合作项目(批准号: 2006DFA31060)资助 |
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| 摘 要： | Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞质低的Na+浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演重要角色, 然而, 到目前为止, 对原核微生物Na+/H+逆向转运蛋白的C末端亲水域的结构和功能还知之甚少. 我们曾从达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis) D-8菌株中克隆得到第一个中度嗜盐菌来源的Na+/H+逆向转运蛋白基因nhaH. 疏水性分析表明, NhaH的C末端亲水域只包含9个氨基酸残基(395PLIKKLGMI403), 大大短于与之高度同源的SynNhaP1和ApNhaP的C末端亲水域. 本研究采用PCR方法, 构建NhaH蛋白的C末端亲水域缺失突变体nhaHΔC. 耐盐性实验表明, C末端亲水域的缺失显著地抑制大肠杆菌缺陷株KNabc的互补能力. 基于荧光强度的翻转膜活性测定结果显示, NhaHΔC的Na+/H+和Li+/H+逆向转运蛋白活性显著低于NhaH, 而且前者的Na+/H+逆向转运蛋白活性向酸端偏移, 表明Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域在阳离子结合、转运和pH感应上起重要作用.
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| 关 键 词： | 达坂喜盐芽孢杆菌 Na+/H+逆向转运蛋白 C末端亲水域 盐抗性 pH感应 |
| 收稿时间： | 2008-01-14 |
| 修稿时间： | 2008-06-13 |
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