谷胱甘肽亲和层析介质的制备条件及其层析特性研究

以琼脂糖凝胶4FF(Sepharose 4 Fast Flow)为基质,1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDGE)为活化剂,通过活化、偶联谷胱甘肽(GSH),得到GSH亲和层析介质.实验结果表明:活化及偶联的优化条件为10,m L基质加入0.42,g Na OH、15,m L二甲基亚砜(DMSO)、15,m L BDGE,反应温度为40,℃,反应时间为6,h;偶联溶液p H 6.5,反应温度为37,℃,反应时间为24,h.在此条件下,环氧基修饰密度可达60~65,μmol/m L;所制备的介质载量为(14.19±0.98)mg/m L.以此介质对谷胱甘肽S–转移酶(GST)、融合蛋白GST-Bcl-2、GST-Ald、GST-PTPN12进行纯化,结果表明,该介质纯化效果较好、载量高、稳定性能较好,可重复使用.

The Preparation of GSH Affinity Chromatographic Adsorbent and the Research of its Chromatographic Characteristics