大鼠原代肝星形细胞的分离与鉴定 |
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引用本文: | 曾淑兰,安运锋,卢超,张立杰,张国海.大鼠原代肝星形细胞的分离与鉴定[J].广西师范大学学报(自然科学版),2014(1). |
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作者姓名: | 曾淑兰 安运锋 卢超 张立杰 张国海 |
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作者单位: | 广西师范大学化学与药学学院; |
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基金项目: | 广西自然科学基金资助项目(2013GXNSFBA019159);广西医药产业人才小高地基金资助项目(1309,1312);药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室主任基金资助项目(CMEMR2012-A15);地方高校国家级大学生创新训练基金资助项目(201210602022) |
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摘 要: | 本文通过二步原位灌注的方法分离得到大鼠肝脏,随后通过机械剪切,用0.2g/L链霉蛋白酶E,0.2g/L胶原酶Ⅳ以及0.1g/L DNaseⅠ消化和分散,筛网过滤、经130g/L Nycodenz密度梯度离心后收集肝星状细胞,经台盼蓝染色后用细胞计数仪鉴定细胞存活率,α-SMA(平滑肌动蛋白)免疫细胞化学染色法鉴定肝星状细胞纯度。结果显示,肝星状细胞的得率为每个肝脏3.5×107个细胞以上,肝星状细胞纯度为95%左右,肝星状细胞存活率为(97.0±3.2)%,满足实验需要。
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关 键 词: | 肝星状细胞 细胞分离 原代培养 鉴定 |
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