| 重组慢病毒介导的人凝血因子Ⅸ cDNA在培养细胞和血友病B小鼠中的表达 |
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| 引用本文： | 陈晓光,朱焕章,李峰,宫菊丽,薛京伦.重组慢病毒介导的人凝血因子Ⅸ cDNA在培养细胞和血友病B小鼠中的表达[J].科学通报,2003,48(18):1949-1953. |
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| 作者姓名： | 陈晓光 朱焕章 李峰 宫菊丽 薛京伦 |
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| 作者单位： | 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海,200433 |
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| 基金项目： | 本工作为国家"八六三"高技术研究发展计划(批准号: 2001AA217181) 资助项目. |
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| 摘 要： | 为探索慢病毒载体介导的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ) cDNA在培养细胞中的表达水平, 及重组慢病毒应用于血友病B基因治疗的可行性, 分别构建由肝特异性启动子ABP调控的hFⅨ的慢病毒载体FAXW, 以及由泛肽-C调控的hFⅨ慢病毒载体FUXW; 用磷酸钙法, 将慢病毒载体与包装质粒CMVΔR8.2和包膜质粒VSV-G共转染产毒细胞293 T, 以制备重组慢病毒. 重组FUXW病毒分别感染293 T, BHK和L-02细胞, 经检测皆有hFⅨ蛋白表达. 重组FAXW病毒感染细胞48 h后, 仅在L-02细胞检测到hFⅨ高表达(630 ng/106细胞), 而在其他感染细胞中hFⅨ表达较低. 将重组FAXW病毒经尾静脉途径注射入血友病B小鼠体内, 小鼠血浆中可检测到接近治疗水平的hFⅨ抗原(45 ng/mL), 且持续时间超过60 d. 上述结果表明, 慢病毒载体介导的基因转移为血友病B基因治疗提供了极有潜力的方法.
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| 关 键 词： | 基因治疗 慢病毒 血友病B小鼠 凝血因子Ⅸ |
| 收稿时间： | 2003-06-18 |
| 修稿时间： | 2003年6月18日 |
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