| 大豆花瓣蛋白双向电泳分析技术体系的优化 |
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| 引用本文： | 郑天慧,宋波,姜自芹,刁桂珠,曾蕊,吴帅,拓云,刘珊珊.大豆花瓣蛋白双向电泳分析技术体系的优化[J].哈尔滨师范大学自然科学学报,2010(6):75-80. |
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| 作者姓名： | 郑天慧 宋波 姜自芹 刁桂珠 曾蕊 吴帅 拓云 刘珊珊 |
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| 作者单位： | 东北农业大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（31071440）; 黑龙江省普通高等学校青年骨干支持计划项目（1155G12）; 博士后研究人员落户黑龙江科研启动项目（2009HB009）; 转基因生物新品种培育重大专项子任务：抗病虫转基因大豆新品种培育资助项目（2008ZX08004-004） |
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| 摘 要： | 双向电泳技术体系的优化是蛋白质组学研究的前提和基础.本文针对大豆花瓣含有大量色素和酚等干扰物质的现象,比较6种蛋白提取方法和2种蛋白裂解液配方,优化胶条范围和等电聚焦程序.结果表明:pH为4～7 IPG胶条适于大豆全花蛋白分离;TCA/丙酮+2D Clean Up试剂盒法去除杂质充分,提取的蛋白含量高、纯度好、分离效果佳、耗时短;蛋白裂解液采用5 mol/L尿素,2 M硫脲,2%CHAPS,2%SB3-10,5 mmol/L TCEP,20 mmol/L DTT,0.5%IPG Buffer为好;增加离心转速、时间和丙酮清洗次数能促进蛋白溶解,增加蛋白纯度,初步建立了一套适合大豆全花蛋白双向电泳分析的技术体系.
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| 关 键 词： | 大豆花瓣 双向电泳 技术体系 优化 |
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