导向溶栓分子scFv-UK32中连接肽的引入和在昆虫细胞中的表达 |
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引用本文: | 鞠武建,胡美浩.导向溶栓分子scFv-UK32中连接肽的引入和在昆虫细胞中的表达[J].北京大学学报(自然科学版),2001,37(6):785-790. |
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作者姓名: | 鞠武建 胡美浩 |
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作者单位: | 北京大学生命科学学院, |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划);863-102-09; |
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摘 要: | 为了提高重组导向溶栓分子scFv-UK32的溶纤活性,通过重组PCR方法在编码scFv与UK32的碱基之间引入编码KLGGGG连接肽的碱基序列,并克隆到转移载体pBacPAK9上,通过与线性病毒DNA BacPAK6/Bsu36I digest共转染到昆虫细胞Sf 9内,进行表达.表达产物分泌到上清中,共转染后第5d(天)用纤维平板法测得Sf 9细胞上清溶纤活性达到107 IU/mL,比未引入连接肽的scFv-UK32的表达活性(25 IU/mL)高.ELISA实验表明共转染上清具有明显对活化血小板特异结合能力.Western Blotting实验表明共转染上清可与Pro-UK的单抗特异结合.
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关 键 词: | 导向溶栓 连接肽 昆虫细胞 表达 |
修稿时间: | 2000年7月25日 |
Introduction of A Linking Peptide to the Thrombolysis-Targeted Protein and Its Expression in Insect Cell |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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