| 腺病毒5型E1A在毕赤酵母中的表达及对肿瘤细胞生长的抑制作用 |
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| 引用本文： | 马业伟,周小山,千新来,赵清正,杨军,高新,李艳春,刘玉英,王争.腺病毒5型E1A在毕赤酵母中的表达及对肿瘤细胞生长的抑制作用[J].科学通报,2003,48(5). |
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| 作者姓名： | 马业伟 周小山 千新来 赵清正 杨军 高新 李艳春 刘玉英 王争 |
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| 作者单位： | 1. 中国协和医科大学,中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所,北京,100021
2. 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 腺病毒5型E1A(Ad5E1A)作为一个抑癌基因, 由于具有较强抑癌作用及显著的化放疗增敏作用而受到人们的关注. 但由于它能整合到宿主细胞基因组中长期表达, 并能使Rb基因失活, 使动物细胞永生化等而引起人们的担心. 为了避免E1A在基因治疗中存在的问题, 设想以E1A蛋白进行探索. 首先构建了E1A真核表达载体(pPIC9/E1A), 转化毕赤酵母(GS115), 筛选高表达重组菌株. 经摇瓶试验, 甲醇诱导表达3 d后, 分泌型的E1A蛋白经HiTrap Q 和HiTrap SP两步柱层析, 获得了较高纯度的E1A蛋白, 并经SDS-PAGE 和Western blot 鉴定. E1A蛋白经Chariot介导能顺利进入细胞, 并大部分定位在细胞核, 使LN686细胞发生明显的G2/M期阻滞, 体外能显著抑制LN686肿瘤细胞生长. 为利用E1A蛋白在肿瘤治疗中应用的可能性提供了实验依据.
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| 关 键 词： | E1A蛋白 酵母表达系统 细胞周期 肿瘤抑制 |
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