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| 粘质沙雷氏菌低温脂肪酶的基因克隆与酶学性质分析 | |
| 作者姓名： | 李婧玒 李仁宽 林娟 叶秀云 |
| 作者单位： | 福州大学生物科学与工程学院,酶高效表达国家工程实验室;福州大学生物科学与工程学院,酶高效表达国家工程实验室 福建 福州;福州大学生物科学与工程学院,酶高效表达国家工程实验室 福建 福州;福州大学生物科学与工程学院 |
| 基金项目： | 国家海洋局海洋公益性行业科研专项资助项目（201305015） |
| 摘 要： | 克隆一个源于北极冻土沙雷氏菌的脂肪酶基因lip18,实现其在大肠杆菌中的表达,并进行酶学性质研究.克隆脂肪酶基因lip18,并构建p ET-28a(+)-lip18重组表达载体,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导优化重组蛋白表达,并研究其酶学性质.克隆得到脂肪酶基因lip18,全长为1 842 bp,编码614个氨基酸.重组菌的诱导温度对蛋白表达影响很大,在最适诱导温度为20℃时脂肪酶大量表达,重组脂肪酶的相对分子质量约为65 ku.酶学性质研究表明:重组酶高效水解C10~C16的中、长链脂肪酸,最适作用温度30℃,最适作用pH值7.0,并且在0℃条件下有一定的催化活性,热稳定性差,是低温中性脂肪酶;同时,对有机溶剂有较好的耐受性. |
| 关 键 词： | 粘质沙雷氏菌 脂肪酶 克隆 表达 性质分析 |
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