| RNA干扰介导对乙型肝炎病毒复制的抑制作用 |
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| 引用本文： | 唐霓,张秉强,闫歌,蒲丹,高小玲,Tong-Chuan He,黄爱龙.RNA干扰介导对乙型肝炎病毒复制的抑制作用[J].科学通报,2004,49(12):1145-1150. |
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| 作者姓名： | 唐霓 张秉强 闫歌 蒲丹 高小玲 Tong-Chuan He 黄爱龙 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010
2. Molecular Oncology Laboratory,The UniVersity of Chicago Medical Center,IL60637,USA |
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| 基金项目： | 本研究为国家杰出青年基金(批准号:30228026)和国家自然科学基金(批准号:30300298)资助项目. |
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| 摘 要： | 构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区或表面抗原编码区的siRNA表达载体pSI-C和pSI-S, 在体外HBV复制细胞模型中观察对HBV复制和表达的影响. 将pSI-C, pSI-S与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV共转染HepG2细胞, 分别在转染后24, 48和72 h, 观察pSI-C和pSI-S对细胞上清和胞内病毒抗原表达的影响, 并用分子杂交方法从病毒复制、转录和翻译水平检测目的基因的表达情况. 实验结果表明, pSI-C及pSI-S能明显抑制细胞内HBsAg和HBcAg的合成, 呈序列特异性和剂量依赖性的特点, 而对照组siRNA无抑制作用. pSI-C比pSI-S抑制作用更强, 转染后第2天对HBsAg和HBeAg抑制率达高峰, 分别为92%和85%. Southern和Northern杂交结果表明, HBV siRNA能降低目的基因转录和病毒复制中间体的表达水平, 提示针对乙型肝炎病毒核心区和表面抗原编码区的siRNA能有效抑制HBV RNA分子转录和病毒复制, 最终降低病毒抗原表达, 这为运用RNAi技术进行HBV基因治疗提供了新的思路.
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| 关 键 词： | 抗病毒治疗 乙型肝炎病毒 RNA干扰 病毒复制 基因治疗 |
| 收稿时间： | 2004-03-05 |
| 修稿时间： | 2004-06-07 |
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