| 重组慢病毒介导的NMD途径因子UPF1和SMG1可诱导干扰细胞株的构建 |
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| 引用本文： | 柴宝峰,常文娟,申泉,王刚.重组慢病毒介导的NMD途径因子UPF1和SMG1可诱导干扰细胞株的构建[J].山西大学学报(自然科学版),2012,35(2):376-382. |
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| 作者姓名： | 柴宝峰 常文娟 申泉 王刚 |
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| 作者单位： | 化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西大学生物技术研究所,山西太原030006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，山西省自然科学基金，山西省留学归国基金项目 |
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| 摘 要： | 无义介导的mRNA降解途径是一个比较完善的异常mRNA的降解机制,结合在外显子拼接复合体上的多种蛋白决定NMD途径对异常转录物的识别和降解的启动,其中UPF1和SMG1发挥主要功能.UPF1是一个RNA解旋酶和RNA依赖的ATP酶；而SMG1具有磷脂酰肌醇激酶活性,负责UPF1的磷酸化.本研究构建了含有UPF1和SMG-1基因发夹结构的诱导开关基因表达干扰质粒.利用慢病毒介导转化哺乳动物细胞HEK293T细胞得到重组病毒,经鉴定后感染细胞AD_293,目的基因在细胞中得以高效表达.通过继代培养和单克隆化,得到强力霉素诱导干扰UPF1和SMG-1表达的稳定细胞株.
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| 关 键 词： | NMD途径 UPF1 SMG1 PTC RNA干扰 shRNA |
Construction of Cell Strain Containing Inducible Interference of NMD Factor UPF1 and SMG1 Mediated by Lentiviral System |
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| CHAI Bao-feng
,
CHANG Wen-juan
,
SHEN Quan
,
WANG Gang.Construction of Cell Strain Containing Inducible Interference of NMD Factor UPF1 and SMG1 Mediated by Lentiviral System[J].Journal of Shanxi University (Natural Science Edition),2012,35(2):376-382. |
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| Authors: | CHAI Bao-feng CHANG Wen-juan SHEN Quan WANG Gang |
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| Institution: | (Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering,Ministry of Education, Institute of Biotechnology,Shanxi University,Taiyuan 030006,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NMD path UPF1 SMG1 premature termination codon RNA interference shRNA |
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