| 中介蝮Asn49-PLA2基因原核表达载体的构建及初步表达 |
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| 引用本文： | 侯彬,张卫柱,张侃,张琛,杨章民.中介蝮Asn49-PLA2基因原核表达载体的构建及初步表达[J].陕西师范大学学报,2008,36(4). |
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| 作者姓名： | 侯彬 张卫柱 张侃 张琛 杨章民 |
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| 作者单位： | [1]陕西师范大学生命科学学院,陕西西安710062 [2]西安回天血液制品有限责任公司,陕西西安710075 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 以来自中介蝮(G.intermedius)毒腺cDNA文库的3个新Asn49-PLA2基因(GI4-PLA2,GIs-PLA2及其突变体G15'-PLA2)为模板,用PCR及DNA重组技术,将三个PLA2基因克隆到原核表达载体pQE-30,并在宿主茵E.coli Rosseta(DE3)中进行诱导表达.Bam H Ⅰ/Hind Ⅲ双酶切及测序结果提示,成功构建了3个原核表达栽体(pQE-30/GI4-PLA2,pQE-30/GI5-PLA2,pQE-30/GI2'-PLA2).SDS-PAGE结果表明,中介蝮的3个Asn49-PLA2基因在大肠杆茵中实现表达,而且在37℃、1mM IPTG的诱导条件下,GI4-PLA2和GI5-PLA2的最佳表达时间为25h,而GI5'-PLA2在15h有较高水平的表达.
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| 关 键 词： | 中介蝮 磷脂酶A2 基因 原核表达 |
Construction of recombinant prokaryotic vector containing Asn49-phospholipases A2 genes from Gloudius intermedius and the preliminary expression |
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