| 三丙二酸富勒烯对DNA限制性内切酶和Taq DNA聚合酶活性的抑制作用 |
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| 引用本文： | 杨新林,陈哲,孟宪梅,李博,谭信.三丙二酸富勒烯对DNA限制性内切酶和Taq DNA聚合酶活性的抑制作用[J].科学通报,2007,52(4):399-403. |
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| 作者姓名： | 杨新林 陈哲 孟宪梅 李博 谭信 |
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| 作者单位： | 北京理工大学生命科学与技术学院,北京,100081 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金（编号：20030007011）和北京理工大学基础研究基金（编号：000Y06）资助项目 |
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| 摘 要： | 采用具有HindⅢ和EcoRⅠ单一酶切位点的pEGFP-N1超螺旋型质粒为底物, 检测三丙二酸富勒烯(trimalonic acid C60, TMA C60)对DNA限制性酶切反应的作用. 同时以该质粒为模板, 测定TMA C60对Taq DNA聚合酶催化的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)的影响. 酶切产物与PCR扩增产物均通过琼脂糖凝胶电泳来显示. 实验发现, 在质粒酶切体系或PCR体系中添加TMA C60后, 酶切或扩增产物的生成量均显著减少. TMA C60的作用存在浓度依赖性, 对HindⅢ, EcoRⅠ两种酶切反应和PCR的半抑制浓度IC50值分别为16.3, 6.0, 6.0 μmol/L. 两种活性氧清除剂L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁和叠氮化钠在浓度为2～10 mmol/L时, 不能拮抗TMA C60对PCR和两种酶切反应的抑制作用. 但是, 在PCR体系中增加Taq DNA聚合酶能够拮抗TMA C60的作用. 这些结果表明, TMA C60能够抑制上述3种DNA代谢相关酶的活性, 其作用可能与活性氧无关.
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| 关 键 词： | 三丙二酸富勒烯 DNA限制性内切酶 Taq DNA聚合酶 活性氧 抑制 |
| 收稿时间： | 2006-10-07 |
| 修稿时间： | 2006-10-072007-01-17 |
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