少棘蜈蚣钾通道毒素多肽KTX-Ssm175的表达、纯化与鉴定 |
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作者单位: | ;1.中南民族大学药学院;2.中南民族大学生物医学工程学院 |
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摘 要: | 采用Illumina II代转录组测序技术构建了湖北少棘蜈蚣毒腺转录组数据库,从中筛选到一个全新的毒素多肽编码基因KTX-Ssm175.经序列比对显示KTX-Ssm175多肽与κ-SLPTX-Ssm1a高度同源,提示KTX-Ssm175多肽为一种新的电压门控性钾通道阻断剂.采用基因工程技术构建了p GEX-4T-1-KTX-Ssm175原核表达载体,通过GST融合蛋白表达法对KTX-Ssm175多肽在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达和分离纯化.MALDI-TOF-MS质谱测定显示纯化的KTX-Ssm175多肽分子量与理论值相吻合,说明成功实现了KTX-Ssm175多肽的基因工程制备,为深入研究其结构与功能提供了物质基础.
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关 键 词: | 少棘蜈蚣 转录组 KTX-Ssm175 钾通道阻断剂 基因工程 |
Expression,Purification and Identification of Potassium Channel Toxins KTX-Ssm175 from Scoropendra subspinipes mutilans |
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