鱼腥藻PCC7120染色体基因对asr0757/alr0758的表达优化及其鉴定 |
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引用本文: | 陈 洁,陈思礼,吴汇兰.鱼腥藻PCC7120染色体基因对asr0757/alr0758的表达优化及其鉴定[J].华中师范大学学报(自然科学版),2016,50(2):0. |
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作者姓名: | 陈 洁 陈思礼 吴汇兰 |
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作者单位: | 中南民族大学 生命科学学院, 武汉 |
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摘 要: | NCBI预测鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asr0757/alr0758可能构成一个毒素-抗毒素系统.为研究其是否属于毒素-抗毒素系统家族,分别构建这两个基因的表达载体.用1.0 mM IPTG诱导重组菌表达,优化表达条件,并对表达出的蛋白进行纯化与western blot检测.SDS-PAGE结果显示:asr0757与alr0758在37℃下诱导6 h后,均成功诱导表达出目的蛋白asr0757(13.5 KD)和alr0758(17.9 KD).抗毒素表达量较好,毒素alr0758表达量较少.通过设置诱导时间梯度和IPTG浓度梯度优化毒素基因表达条件,优化结果显示:毒素基因alr0758在28℃,IPTG浓度为0.4 mM,诱导10 h时有最大表达量.蛋白纯化与western blot结果证实诱导表达的蛋白为目的蛋白.
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关 键 词: | 鱼腥藻PCC7120 asr0757/alr0758 表达 优化 鉴定 |
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