| 日本囊对虾Ran基因的克隆表达与蛋白质GTP结合活性分析 |
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| 引用本文： | 韩芳,王志勇.日本囊对虾Ran基因的克隆表达与蛋白质GTP结合活性分析[J].集美大学学报(自然科学版),2010,15(4):241-247. |
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| 作者姓名： | 韩芳 王志勇 |
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| 作者单位： | 集美大学水产学院,福建,厦门,361021;福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,福建,厦门,361021 |
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| 基金项目： | 福建省农业科技重大项目 |
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| 摘 要： | 在日本囊对虾抑制性差减杂交(suppression subtractive hybrid ization,SSH)研究过程中,首次发现一段经同源比较为Ran基因的部分序列,在抗病日本囊对虾中上调表达.为了进一步探索日本囊对虾Ran基因的功能,通过RACE-PCR的方法克隆得到了日本囊对虾Ran基因全长共1 441个碱基,其中开放阅读框为645个碱基,共编码215个氨基酸,这是首次在海洋无脊椎动物体内克隆到该基因.还将该基因克隆到原核表达载体PGEX-4T-2中并转化大肠杆菌BL21,37℃下诱导6 h,超声裂解表达菌株,结果表明GST-Ran融合蛋白在大肠杆菌中为可溶性表达,蛋白大小约为50 ku,经纯化得到了纯度大于90%的GST-Ran融合蛋白.随后的GTP结合试验验证了Ran蛋白具有GTP结合活性.
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| 关 键 词： | 日本囊对虾 Ran基因 蛋白表达 GTP活性 |
Cloning,Recombinant Expression and GTP-binding Activity Analysis of Ran Gene of Penaeus japonicus |
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| HAN Fang,WANG Zhi-yong.Cloning,Recombinant Expression and GTP-binding Activity Analysis of Ran Gene of Penaeus japonicus[J].the Editorial Board of Jimei University(Natural Science),2010,15(4):241-247. |
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| Authors: | HAN Fang WANG Zhi-yong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RACE-PCR |
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