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烟草节杆菌02181肌酸酶的纯化及理化特性
引用本文:罗侃,崔有宏,曾志南,徐东,贺燕鸿.烟草节杆菌02181肌酸酶的纯化及理化特性[J].甘肃科学学报,2006,18(1):60-63.
作者姓名:罗侃  崔有宏  曾志南  徐东  贺燕鸿
作者单位:解放军兰州医学高等专科学校,生化教研室,甘肃,兰州,730020
摘    要:采用DEAE-纤维素和羟基磷灰石层析联合使用的纯化程序,从烟草节杆菌02181株提取纯化了肌酸酶.比活性由0.92 U/mg上升至124.44 U/mg,酶被提纯了135.26倍,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一区带,最终收率达52.95%.特性研究显示此酶的相对分子量为84500,等电点为4.80,在磷酸盐缓冲体系中,最适pH为6.50,pH7.00环境下耐受性最好,最适温度为35℃,米氏常数(Km)为46.50 mmol/L,最大反应速度(Vmax)为8.20 μmol/min.Cu2 、SDS可使酶完全失活,Hg2 、Cd2 、Zn2 和Fe3 明显抑制酶活性,Mg2 、Mn2 、Brij 35、Triton X-100和邻菲饶啉对酶活性有一定的抑制作用,EDTA对酶活性无明显影响,而Ca2 和NaN3对酶有一定的激活作用.络合剂邻菲饶啉和EDTA对酶活性的抑制试验表明此酶属于金属酶类.

关 键 词:烟草节杆菌  肌酸酶  纯化  特性
文章编号:1004-0366(2006)01-0060-04
收稿时间:2005-08-11
修稿时间:2005年8月11日

Purification and Characteristics of Creatinase from Arthrobacter Nicotianae 02181
LUO Kan,CUI You-hong,ZENG Zhi-nan,XU Dong,HE Yan-hong.Purification and Characteristics of Creatinase from Arthrobacter Nicotianae 02181[J].Journal of Gansu Sciences,2006,18(1):60-63.
Authors:LUO Kan  CUI You-hong  ZENG Zhi-nan  XU Dong  HE Yan-hong
Institution:1. Dept of Biochemistry, Lanzhou Military Medical College, Lanzheu 730020, China
Abstract:
Keywords:Arthrobacter Nicotianae  creatinase(creatine amidinohydrolase)  purification  characteristics
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