| CM-DiI标记兔外周血平滑肌祖细胞可行性分析 |
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| 引用本文： | 周六化,杨斌,夏佳东,王鹏基,陈赟,戴玉田.CM-DiI标记兔外周血平滑肌祖细胞可行性分析[J].南京大学学报(自然科学版),2014(1). |
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| 作者姓名： | 周六化 杨斌 夏佳东 王鹏基 陈赟 戴玉田 |
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| 作者单位： | 南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿男科;上海市第十人民医院;同济大学附属第十人民医院泌尿外科; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31100702/C100307,81170563/H0415);高等学校博士学科点专项科研基金(20110072120054) |
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| 摘 要： | 采用荧光染料CM-DiI标记兔外周血平滑肌祖细胞(SPC),评价其生物可行性.分离和培养SPC,采用CMDiI进行标记,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测标记效果和传代后的细胞标记率.同时,进行细胞爬片培养后免疫荧光染色,观察标记后细胞表达平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙调节蛋白(Calponin)和增殖细胞核抗原(PCNA)的情况.进行台盼蓝排斥实验、细胞粘附实验、细胞增殖实验和细胞迁移实验,观察标记后的SPC存活率以及粘附、增殖和迁移能力的变化.结果发现,培养4d左右可见SPC开始生长,一周后出现SPC克隆.通过免疫荧光和流式细胞术分析,CM-DiI标记率为96%左右,连续传代2周后标记率仍在40%以上.标记后的细胞可表达α-SMA、Calponin和PCNA.同时发现,标记后的细胞存活率无明显降低,细胞粘附能力、增殖能力和迁移能力无明显改变.本研究证明采用CM-DiI标记SPC操作简便,效果好,不改变细胞表型,不影响细胞的存活率和粘附、增殖及迁移能力,可作为SPC的荧光示踪剂.
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| 关 键 词： | 荧光示踪 平滑肌祖细胞 组织工程 CM-DiI |
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