毛细管电泳-激光诱导荧光测定血样中格列吡嗪

本文建立了毛细管电泳-激光诱导荧光法测定格列吡嗪的新方法．采用异硫氰酸荧光素（FITC）为衍生剂,考察了衍生缓冲溶液类型、浓度、pH、反应计量比及背景缓冲溶液类型、pH值、浓度、进样时间、分离电压等对测定格列吡嗪效果的影响．使用未涂层的毛细管柱（47cm×50μmi．d．,有效柱长40cm）,10mmol／LNaHCO3-Na2CO3（pH=9．6）为衍生缓冲溶液,在25℃时,异硫氰酸荧光素与格列吡嗪计量比为40：1条件下闭光反应12h后,以40mmol/LNa2B4O7-NaHCO3（pH=9．4）为背景溶液,在激光波长488nm、运行电压14KV条件下,血浆样品用微超滤除蛋白后直接测定．线性范围为2．24×10^-10～1．12×10^-8mmol／L（r=0．9986）,检出限为10^-10mmol/L．虽然血清白蛋白并不影响测定,但为了降低毛细管的污染,减小毛细管后处理程序,提高分析速度,延长毛细管使用寿命,采用快速微超滤取样以除去蛋白,取得良好效果．