| 小麦幼叶cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 吴耀荣,赵双宜,夏光敏. 小麦幼叶cDNA文库的构建[J]. 山东大学学报(理学版), 2003, 38(2): 101-104 |
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| 作者姓名： | 吴耀荣 赵双宜 夏光敏 |
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| 作者单位： | 山东大学,生命科学学院,山东,济南,250100;山东大学,生命科学学院,山东,济南,250100;山东大学,生命科学学院,山东,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家转基因专项项目J99 A 0 3 7农杆菌介导小麦转化技术的研究 |
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| 摘 要： | 提取小麦辉县红的三叶期幼叶总RNA ,利用RNA5’端模板转换技术 (SMART ,theSwitchMechanismAtthe 5’endofRNATranscript)合成cDNA的第一链 ,再经 2 1个循环的长距离PCR(LD PCR)合成双链cDNA ,经蛋白酶K消化、纯化cDNA、SfiI(A和B)酶切、过CHROMASPIN 4 0 0柱分级分离除去 4 0 0bp以下的小分子 ,与经过 5’端脱磷的λTriplEx2 Sfi(A和B) CIP载体进行连接 ,经体外包装和感染XL1 BLue宿主菌 ,得到了 1.0 0 5 6× 10 6 个独立的噬菌体克隆 .从中随机挑选 10 0个克隆进行PCR反应 ,电泳结果显示PCR产物大于 5 0 0bp的片段占 81% ,由此认为小麦幼叶cDNA文库已建立
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| 关 键 词： | 小麦 幼叶 SMART cDNA文库 |
| 文章编号： | 1671-9352(2003)02-0101-04 |
| 修稿时间： | 2001-12-21 |
Construction of cDNA Library in Wheat Leaves |
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| WU Yao rong,ZHAO Shuang yi & XIA Guang min. Construction of cDNA Library in Wheat Leaves[J]. Journal of Shandong University, 2003, 38(2): 101-104 |
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| Authors: | WU Yao rong ZHAO Shuang yi & XIA Guang min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | wheat leaf SMART cDNA library |
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