番茄真核翻译起始因子4E基因RNA干涉及其抗病毒特性研究

植物真核翻译起始因子4E（eIF4E）在蛋白质翻译过程中发挥重要作用．最近研究表明eIF4E在参与植物病毒互作，影响病毒在寄主中复制和侵染过程．文中通过RNA干涉调控番茄eIF4E表达，鉴定eIF4E在植物病毒互作中的作用．根据数据库假设性一致序列（TC171564，TC170275）分别克隆了番茄“中蔬五号”SleIF4E基因及其异构体基因SleIF（iso）4E．构建了SleIF4ERNAi抑制表达载体pSL4D，通过农杆菌介导的方法导入番茄品种“中蔬五号”基因组．PCR检测和Southern blot结果表明，目标基因已整合到番茄基因组中．通过半定量RT-PCR对转基因番茄进行eIF4E表达分析，表明pSL4D转化番茄中eIF4E得到不同程度抑制．转基因植株分别接种PVY和CMV两种病毒，病毒ELISA测定和病毒RNA积累量分析表明，pSL4D转化植株相对于对照组均获得不同程度的病毒抗性，番茄eIF4E参与PVY的复制或侵染寄主过程．就不同病毒而言，RNAi对PVY抗性的调控效果比CMV调控效果好，抑制PIF4E表达可提高植物对PVY的抗性．