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利用SELEX技术筛选小檗碱核酸适配体及其亲和力表征
作者姓名:张丽娜  赵鹏  田国英  田平芳
作者单位:1. 北京化工大学 生命科学与技术学院, 北京 100029;2. 石家庄市农林科学研究院, 石家庄 050041
基金项目:国家自然科学基金(21276014/21476011)
摘    要:小檗碱是一种价格低廉且生物安全性良好的小分子化合物,筛选能与小檗碱互相作用的核酸片段,旨在开发新型遗传元件并拓展其在生物技术领域的应用。利用指数富集的配基系统进化技术(SELEX),经8轮实验从随机单链DNA文库中筛选出4条能与小檗碱高度特异性结合的核酸适配体。对其中两条重现性较好的适配体进行结构模拟分析表明,适配体序列富含鸟嘌呤和胞嘧啶且多形成茎环及G-四链体结构。亲和力测定结果显示,其中的2条核酸适配体与小檗碱作用的解离常数Kd都处于nmol级,表现出较高的亲和力,适配体S1的Kd值最小,仅为523 nmol/L,与小檗碱亲和力最大。

关 键 词:小檗碱   指数富集的配基系统进化技术(SELEX)   核酸适配体
收稿时间:2018-04-16
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