基因工程菌株产生人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究——Ⅰ.β-Galactosidase-hCG的分离纯化与鉴定 |
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引用本文: | 罗玉香,吴伯良,刘杰森.基因工程菌株产生人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究——Ⅰ.β-Galactosidase-hCG的分离纯化与鉴定[J].暨南大学学报,1988(1). |
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作者姓名: | 罗玉香 吴伯良 刘杰森 |
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作者单位: | 暨南大学生殖免疫研究中心,暨南大学生殖免疫研究中心,暨南大学生殖免疫研究中心 |
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摘 要: | 通过寡核苷酸合成仪,用化学方法合成相当于hcGβ链C末端36肽基因的片段,成功地克隆到噬菌体载体λgt11中,并在宿主菌株E. coli y_(1089)中得到表达。含λgt11 hCG重组体的E. coli y_(1089)所合成的含人类绒毛膜促性腺激素β链c末36肽的杂交蛋白(下称:β—galactosidase—hCG),通过硫酸铵沉淀、亲和层析和制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳,可得电泳纯单一色带的β—gaIactosidase—hCG。蛋白质转印(Western Blot)技术证实β—galactasidase—hCG具有hCGβ链c末端36肽的免疫特性。对流免疫电泳和免疫双扩散试验结果表明β—galactosidase—hCG具免疫原性。从一立升培养液的菌体中可分离纯化约3.8毫克的β—galaetosidase—hCG。
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关 键 词: | 噬菌体载体λgt11 DNA重组体λgt11 hCG 宿主菌株E. coli Y_(1089) 人绒毛膜促腺激素(hCG) (亲和层析 蛋白质转移电泳(Western Blot) |
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