| 乙肝表面抗原在分泌型毕赤酵母中的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 王亚妮,黄宗炎,朱娟莉,董兆麟,崔亚丽,陈超.乙肝表面抗原在分泌型毕赤酵母中的表达及纯化[J].西北大学学报,2008,38(4). |
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| 作者姓名： | 王亚妮 黄宗炎 朱娟莉 董兆麟 崔亚丽 陈超 |
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| 作者单位： | [1]西北大学生命科学学院／国家微检测系统工程技术研究中心 [2]陕西西大北美基因股份公司,陕西西安710069 [3]陕西省眼科研究所 西安市第一医院,陕西西安710002 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的对分泌型毕赤酵母中表达乙肝表面抗原并进行亲和层析纯化。方法从已确诊的乙肝患者阳性血清中提取乙肝病毒DNA，PCR扩增乙肝病毒表面抗原编码基因S，将其插入含有仅分泌信号肽序列和6个组氨酸纯化标签的毕赤酵母表达载体pPICZα，成功构建了重组表达载体pPICZα—HBVs。电转化酵母菌株GS115，得到重组乙肝表面抗原S的酵母表达菌株。结果诱导培养基BMMY中甲醇终浓度为1％，诱导表达48h重组蛋白表达量及抗原性达到最高。非变性条件下亲和层析纯化后，薄层扫描分析得到纯度超过95％，表达量约为2mg／L的重组蛋白。结论Western-blot和ELISA分析表明，所得产物为乙肝表面抗原S蛋白，其纯度和产量足以免疫小鼠制备单克隆抗体。
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| 关 键 词： | 乙肝表面抗原 分泌表达 毕赤酵母 |
The expression and purification of HBsAg in secreted Pichia pastoris |
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| WANG Ya-ni,HUANG Zong-yan,ZHU Juan-li,DONG Zhao-Lin,CUI Ya-li,CHEN Chao.The expression and purification of HBsAg in secreted Pichia pastoris[J].Journal of Northwest University(Natural Science Edition),2008,38(4). |
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| Authors: | WANG Ya-ni HUANG Zong-yan ZHU Juan-li DONG Zhao-Lin CUI Ya-li CHEN Chao |
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