| HIV-1复合多表位基因的原核表达和多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 李英辉,赵亚,刘忠湘,毛张翔,黄豫晓,薛采芳. HIV-1复合多表位基因的原核表达和多克隆抗体制备[J]. 科学技术与工程, 2008, 8(12): 3119-3123 |
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| 作者姓名： | 李英辉 赵亚 刘忠湘 毛张翔 黄豫晓 薛采芳 |
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| 作者单位： | 第四军医大学病原生物学教研室,西安,710032;第四军医大学病原生物学教研室,西安,710032;第四军医大学病原生物学教研室,西安,710032;第四军医大学病原生物学教研室,西安,710032;第四军医大学病原生物学教研室,西安,710032;第四军医大学病原生物学教研室,西安,710032 |
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| 摘 要： | 为表达HIV-1复合多表位基因并制备其多克隆抗体.设计引物,以HIV-1标准株全长cDNA序列为模板,PCR扩增获得p24基因片段;合成改造后的多个表位基因MEG并且与p24片段相连接,克隆入大肠杆菌.将测序正确的p24MEG基因克隆入原核表达载体pET32a并诱导表达.采用Ni2 -NTA亲和柱纯化目的蛋白,以p24抗体对纯化蛋白进行Western-blot分析.将纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体.通过PCR成功获得长度为651 bp的HIV-1的p24片段,获得了与多表位基因连接后的p24MEG基因,通过诱导表达,显示在相对分子量约45 000处有预计大小的特异性条带,表明成功表达出融合蛋白.经此纯化的融合蛋白免疫的家兔能产生特异性抗体,其滴度达到1:3 200.纯化的融合蛋白和多克隆抗体为研究新型HIV疫苗奠定一定的理论和实践基础.
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| 关 键 词： | HIV-1 复合多表位基因 原核表达 多克隆抗体 |
Expression of HIV-1 Fusion Multi-epitope Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| LI Ying-hui,ZHAO Y,LIU Zhong-xiang,MAO Zhang-xiang,HUANG Yu-xiao,XUE Cai-fang. Expression of HIV-1 Fusion Multi-epitope Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J]. Science Technology and Engineering, 2008, 8(12): 3119-3123 |
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| Authors: | LI Ying-hui ZHAO Y LIU Zhong-xiang MAO Zhang-xiang HUANG Yu-xiao XUE Cai-fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HIV-1 |
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