| 金黄色葡萄球菌VBNC 状态的诱导条件和EMA-qPCR 检测 |
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| 作者姓名： | 余以刚 田聪 肖性龙 陶文扬 黎金霞 吴晖 |
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| 作者单位： | 华南理工大学 轻工与食品学院, 广东 广州 510640 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31101279);教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助课题(20110172120034);华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2011ZM0101);广东省天然产物绿色加工与产品安全重点实验室开放课题(201101) |
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| 摘 要： | 为建立金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus) 活的非可培养( VBNC) 状态的诱导条件模型,考察了温度、盐度和酸度3 个因素对金黄色葡萄球菌细菌可培养数的影响,通过正交试验优化得到了VBNC 状态的诱导条件,同时观察细菌可培养数的变化,建立了DNA 结合染料叠氮溴乙锭(EMA) 与qPCR 技术相结合检测VBNC 金黄色葡萄球菌的方法. 实验结果表明:细菌可培养数受酸度的影响最大,VBNC 状态的最佳诱导条件为菌液在含15%NaCl 和0. 3%乙酸的营养肉汤培养基中于4 ℃下培养12 d;通过正交试验诱导后的不可培养菌可由EMA-qPCR 方法有效检出,其与qPCR 法的Ct 值( 荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数)之差在1. 29 ~8. 56 之间变化.
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 活的非可培养状态 诱导条件 叠氮溴乙锭 qPCR |
| 收稿时间： | 2012-05-25 |
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