基于全局转录工程促进肺炎克雷伯氏菌吡咯喹啉醌的生物合成 |
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引用本文: | 张军静,田平芳.基于全局转录工程促进肺炎克雷伯氏菌吡咯喹啉醌的生物合成[J].北京化工大学学报(自然科学版),2014,41(3):92. |
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作者姓名: | 张军静 田平芳 |
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作者单位: | 北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室,北京 100029;北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室,北京 100029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(21076013/21276014) |
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摘 要: | 用易错PCR构建肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)RNA聚合酶rpoD基因的突变文库,将其与载体连接后转化肺炎克雷伯氏菌,从1500个阳性克隆中筛选出一株吡咯喹啉醌(PQQ)生产菌。发酵试验表明,该工程菌的PQQ产量为76mg/mL,比携带未突变rpoD基因的对照菌提高了10%。测序发现rpoD基因在核酸和蛋白质水平的突变率分别达到2.5%和0.5%。二级结构预测发现α螺旋、β转角和无规则卷曲数目均发生了变化,推测由此改变了σ因子与启动子的亲和程度,从而导致了PQQ基因的转录以及K. pneumoniae代谢流量再分配,使得PQQ得到更高效表达。
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关 键 词: | 肺炎克雷伯氏菌 σ因子 rpoD 吡咯喹啉醌 |
收稿时间: | 2013-12-18 |
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