朱鹮RAPD反应体系优化研究

目的研究朱鹮RAPD反应中Mg2+浓度、复性温度、引物浓度、Tag酶浓度和DNA模板量等几种因素对扩增结果的影响,并探讨反应的最优条件。方法以朱鹮DNA为材料进行RAPD试验,对Mg2+浓度、复性温度、引物浓度、Tag酶浓度和DNA模板量进行梯度设置,每次仅改变一个参数,并保持其他条件不变。结果建立了一套适用于朱鹮的RAPD反应体系。结论优化后的朱鹮RAPD反应条件为:反应总体积25μL,其中含Mg2+（25 mM）2.5μL,10×Buffer2.5μL,dNTPs（10mM）0.5μL,引物（8μmol/L）1.0μL,Tag酶（3 U/μL）0.4μL,DNA模板（10 ng/μL）3.0μL;PCR循环中复性温度为37℃。