| 四氢噻吩-3-酮还原酶的筛选与表征 |
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| 引用本文： | 严阳,郁惠蕾,潘江,许建和.四氢噻吩-3-酮还原酶的筛选与表征[J].华东理工大学学报(自然科学版),2019,45(1). |
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| 作者姓名： | 严阳 郁惠蕾 潘江 许建和 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 ,生物催化与合成生物技术研究室 ,上海200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 ,生物催化与合成生物技术研究室 ,上海200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 ,生物催化与合成生物技术研究室 ,上海200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 ,生物催化与合成生物技术研究室 ,上海200237 |
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| 摘 要： | 通过基因挖掘技术获得一种来源于炭疽芽胞杆菌的短链脱氢酶BaCR1。它能够催化四氢噻吩-3-酮的不对称还原反应,进而合成碳青霉烯类抗生素硫培南的重要手性中间体(R)-四氢噻吩-3-醇。对BaCR1进行了催化性能表征,结果表明最适反应pH为7.0,最适反应温度为30℃,催化剂转化数(k_(cat))与米氏常数(K_M)之比(k_(cat)/K_M)为0.25 L/(mmol·s)。在100 mL的反应体系中,偶联葡萄糖脱氢酶用于辅酶再生,在底物上载量为50 mmol/L、重组大肠杆菌整细胞(干重)上载量为20 g/L的条件下,无需额外添加辅因子NADPH,反应24 h,转化率大于99%,还原产物的e.e.值为84%,实现了产物的克级制备,体现了酶法不对称还原制备(R)-四氢噻吩-3-醇的潜力。
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| 关 键 词： | 羟基还原酶 (R)-四氢噻吩-3-醇 硫培南 酶促不对称还原 |
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