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Elafin重组腺病毒载体在气道上皮细胞中表达的时相性变化研究
引用本文:杜先智,周向东.Elafin重组腺病毒载体在气道上皮细胞中表达的时相性变化研究[J].西南师范大学学报(自然科学版),2007,32(2):98-102.
作者姓名:杜先智  周向东
作者单位:重庆医科大学,附属第二医院呼吸内科,重庆,400010
基金项目:重庆市应用基础研究项目(200332)
摘    要:为研究elafin重组腺病毒表达载体Ad~elafin转染气道上皮细胞的特性,探讨其在上皮细胞中表达的时相性变化,运用①应用原代培养技术培养人气道上皮细胞;②Ad—elafin表达载体转染气道上皮细胞;③在转染后不同的时相中,采用荧光显微镜观察报告基因GFP的表达,ELISA法单克隆抗体检测细胞上清液elafin蛋白的表达,Northern膜杂交检测elafin基因mRNA的表达量等方法进行研究.发现:①原代培养人气道上皮细胞约5d即可作为靶细胞。②转染Ad—elafin24h时,荧光显微镜下可见上皮细胞内有少量的GFP表达,随着时间的延长,细胞内荧光逐渐增加,96h时GFP荧光阳性的细胞约为80%。③转染24~96h,实验组细胞上清液elafin的含量高于对照组(p〈0.01);同时elafinmRNA的水平高于对照组(P〈0.05,0.01),且elafin表达及elafinmRNA水平在一定时间内呈时间依赖性关系。结论:Elafin重组腺病毒表达载体Ad—elafin成功转染人气道上皮细胞,目的基因不仅能在上皮细胞中表达,而且elafin蛋白具有细胞外分泌作用.

关 键 词:Elafin  上皮细胞  气道
文章编号:1000-5471(2007)02-0098-05
修稿时间:2006-10-10

Changes of the Expression of Ad-Elafin in Human Primary Airway Epithelial Cell
DU Xian-zhi,ZHOU Xiang-dong.Changes of the Expression of Ad-Elafin in Human Primary Airway Epithelial Cell[J].Journal of Southwest China Normal University(Natural Science),2007,32(2):98-102.
Authors:DU Xian-zhi  ZHOU Xiang-dong
Institution:Department of Respiratory Medicine, The Second Affiliated Hospital, Chongqing Universityof Medical. Sciences, Chongqing 400010, China
Abstract:
Keywords:elafin  epithelial cells  airway
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