在大肠杆菌中直接克隆白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)基因启动子 |
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作者姓名: | 宋旭 曾凡亚 张义正 |
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作者单位: | 四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家教委回国人员基金 |
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摘 要: | 利用启动子探钍型载体pSUPV4 直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium )的基因启动子片段.这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重组卡那霉素抗性基因(rkanr)的表达,不同片段赋予宿主细胞以不同的卡那霉素抗性水平,最高的可达1000μg/m L,最低的则为50μg/m L.琼脂糖凝胶电泳显示这些重组质粒DNA 中均有不同大小的插入片段,其范围是0.5~6.0kb.选取一个插入3.9kb 的重组质粒pPC33 所作的Southern 杂交结果表明,插入片段以单拷贝形式存在于P.chrysosporium 的基因组中.当此片段5′-端被除去1.8kb 后,余下的2.1kb 片段可使融合的Kanr 基因的表达效率提高60% .
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关 键 词: | Q781启动子探针型载体 黄孢平革菌 基因启动子 大肠杆菌 |
修稿时间: | 1998-10-05 |
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