| ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达 |
| |
| 作者姓名： | 李丽 周学章 李敏 王玉炯 |
| |
| 作者单位： | 宁夏大学,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏,银川,750021;宁夏大学,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏,银川,750021;宁夏大学,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏,银川,750021;宁夏大学,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏,银川,750021 |
| |
| 摘 要： | ![]()
利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/(ChIFN-α从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asmraginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α将重组质粒经IPTG诱导5 h.用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChlFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α).
|
| 关 键 词： | 鸡α-干扰素基因 L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ信号肽 克隆 表达 |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
