| 磁螺菌MSR-1磁小体缺失突变株NM21 Tn5侧翼序列的克隆及功能分析 |
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| 作者姓名： | 李峰 李颖 姜伟 王珍芳 李季伦 |
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| 作者单位： | 农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学生物学院,北京,100193;淮北煤炭师范学院生命科学学院,资源植物生物学安徽省重点实验室,淮北,235000;农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学生物学院,北京,100193 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号: 30570023)和安徽省淮北市科研计划(编号: 070114)资助项目 |
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| 摘 要： | 利用mini-Tn5 lacZ2对磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense) MSR-1进行转座插入突变, 获得磁小体缺失突变株NM21. 通过锚定PCR从NM21中克隆出Tn5插入位点的侧翼序列, 获得长3073 bp的DNA片段, 其中含有3个ORF, Tn5插入在ORF1中, 互补实验证明该片段与磁小体合成相关. 对ORF1编码的蛋白进行同源比较和功能分析, 发现ORF1编码的蛋白中部有4个跨膜螺旋, 与其同源性较高的序列全部为二价阳离子转运蛋白. BLAST软件分析表明, ORF1编码的蛋白具有COG0053和PRK09509结构域, 与FieF和MMT1等二价阳离子转运蛋白家族CDF (cation diffusion facilitator)有相同的结构域, 推测其为磁小体膜上Fe2+的转运蛋白, 且可能在去除Fe2+对细胞毒害的过程中起着重要作用.
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| 关 键 词： | M.gryphiswaldense 磁小体缺失突变株 基因克隆 功能分析 Fe2+转运蛋白 |
| 收稿时间： | 2008-12-22 |
| 修稿时间： | 2009-03-02 |
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