利用His-杆状病毒表达系统制备HPV16L1VLP |
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引用本文: | 陈宏伟,郑瑾,杨筱凤,王静,来宝长,司履生,王一理.利用His-杆状病毒表达系统制备HPV16L1VLP[J].西北大学学报,2005,35(1):67-70. |
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作者姓名: | 陈宏伟 郑瑾 杨筱凤 王静 来宝长 司履生 王一理 |
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作者单位: | 西安交通大学生命科学与技术学院 陕西西安710061
(陈宏伟,郑瑾,杨筱凤,王静,来宝长,司履生),西安交通大学生命科学与技术学院 陕西西安710061(王一理) |
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基金项目: | 国家“863”高科技研究发展计划资助项目(2001AA215221) |
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摘 要: | 目的 改进现有的昆虫细胞表达和纯化HPV16L1蛋白系统,寻找一种经济、简便、省时的HPV16病毒样颗粒(VLP)疫苗的制备方法。方法 将HPV16L1基因重组入带有 6×His标签的杆状病毒基因组, 并转染昆虫细胞 (Sf 9)进行表达。用镍柱纯化表达蛋白;以小鼠红细胞凝集试验和凝集抑制试验鉴定蛋白生物活性,用透射电镜观察VLP形成。结果 使用新的表达和纯化系统获得HPV16L1高效表达。小鼠红细胞凝集试验和凝集抑制试验证实纯化的HPV16L1蛋白具有HPV16L1的生物学活性;透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP。结论 带有 6×His短肽的HPV16L1蛋白具有与HPV16L1蛋白同样的生物学活性和自组装成VLP的能力,现时的表达纯化系统,提供了一个省时、省力、简便、经济的制备HPV16VLP疫苗的方法。
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关 键 词: | 人乳头瘤病毒L1蛋白 蛋白纯化 病毒样颗粒 |
文章编号: | 1000-274X(2005)01-0067-04 |
修稿时间: | 2004年7月2日 |
Functional HPV16L1 VLP can be efficiently expressed by His-tag baculovirus expression system |
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Abstract: | |
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Keywords: | human papillimavirus protein purification virus like particle |
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