接骨草蔗糖酶同工酶的分离纯化及其部分性质研究 |
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作者姓名: | 褚波 武忠亮 唐云明 |
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作者单位: | 西南大学,生命科学学院,重庆,400715 |
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基金项目: | 重庆市科委资助项目CSTC,2004AC1012, |
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摘 要: | 从接骨草幼叶中提取的蔗糖酶粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析纯化,得到3种同工酶.对3种同工酶进行SDS-PAGE和IEF电泳均显示一条蛋白带,其亚基分子量分别为45.8KD,44.3KD,43.2KD;等电点分别为pH4.0,pH3.8,pH3.75.凝胶过滤测得3种同工酶全酶分子量分别为91.2KD,89.1KD,87.4KD,表明3种同工酶均由2个相同亚基组成,其表观Km分别为30mmol/L,57.1mmol/L,65mmol/L;Vmax分别为98μg/min,48μg/min,35μg/min.同工酶Ⅰ和同工酶Ⅲ在pH4.4~5.0时有最大活性,同工酶Ⅱ则在pH3.9~4.2时有最大活性.3种同工酶均在pH3-6范围内比较稳定.同工酶Ⅰ和同工酶Ⅱ在48~52℃有最大活性,同工酶Ⅲ在50~55℃有最大活性.3种同工酶均在50℃以下有较好的稳定性.
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关 键 词: | 接骨草叶片 蔗糖酶 同工酶 分离纯化 性质 |
文章编号: | 1000-5471(2005)06-1116-06 |
收稿时间: | 2004-12-02 |
修稿时间: | 2004-12-02 |
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