环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)参与人hsp90β基因的热诱导表达 |
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引用本文: | 刘秉胜,吴宁华,沈珝琲.环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)参与人hsp90β基因的热诱导表达[J].科学通报,2001,46(15):1300-1303. |
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作者姓名: | 刘秉胜 吴宁华 沈珝琲 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所中国协和 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(批准号:39930050,39770169). |
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摘 要: | 为研究cAMP应答元件(CRE)在人热休克蛋白hsp90β基因表达中的作用,构建了数个受hsp90β基因不同长度调控片段介导的氯毒素乙酰基转移酶(CAT)报告基因质粒。分别转染Jurkat细胞并检测42℃1h热诱导前后CAT活性。结果发现删除hsp90β基因上游含CRE片段(-173/-91bp)后,CAT的热诱导表达活性降低了67%。电泳迁移率变更分析(EMSA)显示热休克后Jurkat细胞的核抽提物中磷酸化的CREB与该片段呈特异性结合。Western印迹实验及PKA活性检测发现CREB的磷酸化程度及PKA活性均随热诱导时间的延长而增加。以上结果表明:磷酸化的CREB通过与hsp90β基因上游的CRE结合参与该基因的热诱导表达,并可能与PKA传导途径有关。
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关 键 词: | hsp90β基因 CREB 环腺苷酸应答元件 结合蛋白 热诱导表达 人热体克蛋白 |
收稿时间: | 2000-12-18 |
修稿时间: | 2000年12月18 |
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