红景天属植物叶片RNA高效提取的方法

为建立高效提取几种红景天属植物叶片RNA的方法,试验以采自西藏林芝色季拉山的大花红景天为材料,分析了CTAB法,Trizol法,SDS法,尿素法提取叶片RNA的可行性,并利用Nano Drop 1 000、RTPCR和q RT-PCR等手段分析了该方法获得RNA的质量.结果显示,SDS法和CTAB-异丙醇均可得到完整的RNA条带,但是相比于SDS法,后者所提取的RNA产率较高,质量完整,条带清晰.随后对9种不同产地,不同品种的红景天进行RNA的提取,并用Nano Drop 1 000、RT-PCR分析结果.结果显示,所提取RNA的浓度均在200 ng/μL之上,A260/A280均在2.0-2.2之间,A260/A230均大于1.8.此外利用q RT-PCR获得18S内参基因的标准曲线相关系数为0.983.因此证明所提取的RNA的纯度、完整性和产率较高,蛋白、多糖及多酚类物质去除干净.所以CTAB-异丙醇法可以适用于红景天属叶片RNA的提取,为红景天的分子生物学研究奠定了基础.