RRARγ配体结合域的表达、纯化和鉴定 |
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引用本文: | 王小行,郭砚,等.RRARγ配体结合域的表达、纯化和鉴定[J].四川大学学报(自然科学版),2001,38(6):919-923. |
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作者姓名: | 王小行 郭砚 |
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作者单位: | [1]成都地奥集团药物研究所,成都610041 [2]四川大学生命科学学院,成都610064 |
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摘 要: | 提取MCF-7乳腺癌细胞的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出hPPARγ/LBD cDNA,并克隆于载体pGEX-1γT上,测序表明该序列与己报道序列相同,将其转入BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达GST-hPPARγ/LBD,在不同培养温度或IPTG诱导浓度下,GST-hPPARγ/LBD以可溶或包涵体形式存在,表达产物经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化,可被抗hPPARγ多克隆抗体特异识别,并与其天然配体发生特性异结合。
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关 键 词: | PPARγ配体结合域 基因表达 纯化 鉴定 抗糖尿病药物 乳腺癌细胞 克隆 |
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